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डिंग जिंगनुओ, झाओ वेइफेंग, संक्रामक रोग विभाग, सूज़ौ विश्वविद्यालय का पहला संबद्ध अस्पताल, सूज़ौ शहर, जिआंगसु प्रांत, 215000 दूरभाष।14.1% के 5 साल के समग्र अस्तित्व के साथ पाचन तंत्र के ट्यूमर।एचसीसी के कई रोगियों का निदान एक उन्नत चरण में किया जाता है, इसलिए एचसीसी से मृत्यु दर को कम करने के लिए प्रारंभिक जांच आवश्यक है।सीरम अल्फा-भ्रूणप्रोटीन (एएफपी), लेंस लेक्टिन-रिएक्टिव अल्फा-भ्रूणप्रोटीन (एएफपी-एल 3), और असामान्य प्रोथ्रोम्बिन (विटामिन के की कमी से प्रेरित प्रोटीन II, पीआईवीकेए-द्वितीय), द्रव बायोप्सी तकनीक जैसे आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले पहचान संकेतकों के अलावा यह एचसीसी का पता लगाने में नैदानिक ​​​​मूल्य का दिखाया गया है।आक्रामक प्रक्रियाओं की तुलना में, द्रव बायोप्सी परिसंचारी घातक मेटाबोलाइट्स का पता लगा सकता है।द्रव बायोप्सी तकनीक परिसंचारी ट्यूमर कोशिकाओं, परिसंचारी ट्यूमर डीएनए, परिसंचारी आरएनए और एक्सोसोम का पता लगाती है और एचसीसी की प्रारंभिक जांच, निदान और रोग-संबंधी मूल्यांकन के लिए उपयोग की जाती है।यह लेख होनहार बायोमार्कर को अलग करने के लिए आणविक जीव विज्ञान और विभिन्न द्रव बायोप्सी तकनीकों के अनुप्रयोग की समीक्षा करता है जो उच्च जोखिम वाले एचसीसी समूहों की प्रारंभिक जांच में सुधार के लिए एचसीसी के प्रारंभिक मूल्यांकन के लिए व्यवहार्य विकल्प हो सकते हैं।कीवर्ड: द्रव बायोप्सी तकनीक, हेपैटोसेलुलर कार्सिनोमा, उच्च जोखिम वाला समूह।
हेपेटोसेलुलर कार्सिनोमा (एचसीसी) पाचन तंत्र का एक सामान्य घातक ट्यूमर है, जो पुरुषों और महिलाओं दोनों में घातक ट्यूमर के नए मामलों में छठे स्थान पर है।1 दुनिया भर में, लीवर कैंसर फेफड़े और कोलोरेक्टल कैंसर के बाद कैंसर से होने वाली मौतों का तीसरा प्रमुख कारण है, जो सभी घातक नियोप्लाज्म से होने वाली कैंसर से संबंधित मौतों का 8.3% है।1 एचसीसी का पूर्वानुमान निदान के चरण से निकटता से संबंधित है।एचसीसी में खराब अस्तित्व के मुख्य कारण इंट्राहेपेटिक मेटास्टेस, पोर्टल शिरापरक ट्यूमर थ्रोम्बी, और दूर के मेटास्टेस हैं जो स्नेह को रोकते हैं, और इनमें से कई विशेषताएं निदान के समय रोगियों में पहले से मौजूद हैं।
नैदानिक ​​​​और उपचार दिशानिर्देशों के आधार पर, एचसीसी विकसित करने के लिए मुख्य जोखिम कारक यकृत का सिरोसिस, क्रोनिक हेपेटाइटिस बी वायरस (एचबीवी) या हेपेटाइटिस सी वायरस (एचसीवी) संक्रमण, अल्कोहल फैटी लीवर रोग और गैर-अल्कोहल फैटी लीवर रोग (एनएएफएलडी) हैं। )2 इसके अलावा, एचसीसी के जोखिम कारकों में एफ्लाटॉक्सिन-दूषित भोजन का सेवन, शिस्टोसोमियासिस, सिरोसिस के अन्य कारण, यकृत कैंसर का पारिवारिक इतिहास, मधुमेह, मोटापा, धूम्रपान और नशीली दवाओं से प्रेरित जिगर की चोट शामिल हैं।35- और 45 वर्षीय उच्च जोखिम वाले समूहों को नियमित चिकित्सा जांच करवानी चाहिए।एचसीसी के साथ रोगियों के समग्र अस्तित्व में सुधार के लिए प्रारंभिक जांच एक महत्वपूर्ण प्रारंभिक उपचार रणनीति है।
AFP, AFP-L3 और PIVKA-II जैसे बायोमार्कर HCC3,4 की शीघ्र जांच के लिए अनुशंसित हैं।तरल बायोप्सी तकनीकों ने शीघ्र निदान और उपचार मूल्यांकन में आशाजनक परिणाम दिखाए हैं।5,6 एचसीसी तरल बायोप्सी में महत्वपूर्ण प्रगति हुई है, जिसमें आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले सीरम मार्कर जैसे एएफपी (तालिका 1) की तुलना में उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता हो सकती है।
एएफपी एचसीसी में व्यापक रूप से उपयोग किया जाने वाला बायोमार्कर है और वर्तमान में रोग की प्रारंभिक जांच, निदान और मूल्यांकन के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाने वाला सबसे विस्तृत बायोमार्कर है।लगातार ऊंचा एएफपी स्तर एचसीसी की प्रगति के लिए एक जोखिम कारक माना जाता है।7,8 अल्ट्रासाउंड और कंप्यूटेड टोमोग्राफी के विकास के साथ छोटे हेपेटोसेलुलर कार्सिनोमा (एसएचसीसी) की पहचान दर बढ़ रही है, और एएफपी नैदानिक ​​अभ्यास में एचएचसीसी का पता लगाने के लिए विशेष रूप से असंवेदनशील पाया गया है।पूर्वव्यापी बहुकेंद्रीय अध्ययन9 के अनुसार, एचसीसी मामलों के 46% (616/1338) और एसएचसीसी मामलों के 23.4% (150/641) में एएफपी पॉजिटिव पाया गया।इसके अलावा, पुरानी जिगर की बीमारी और सिरोसिस वाले रोगियों में एएफपी का स्तर ऊंचा हो जाता है।10 इस प्रकार, एएफपी का एसएचसीसी के लिए सीमित स्क्रीनिंग प्रभाव है।11 हेपेटोसेलुलर कार्सिनोमा के लिए एशिया-प्रशांत नैदानिक ​​​​अभ्यास दिशानिर्देशों के अनुसार, एएफपी के उपयोग की अनुशंसा नहीं की जाती है। 12 नैदानिक ​​​​सबूत बताते हैं कि एचसीसी के उपचार में पीआईवीकेए-द्वितीय एएफपी से बेहतर है और पीआईवीकेए-द्वितीय और एएफपी का संयोजन है एचसीसी में एक उच्च नैदानिक ​​मूल्य।13 ऊतक बायोप्सी की तुलना में, द्रव बायोप्सी मुख्य रूप से शरीर के तरल पदार्थ (रक्त, लार, फुफ्फुस द्रव, मस्तिष्कमेरु द्रव, या मूत्र) में ट्यूमर से जुड़े मेटाबोलाइट्स का पता लगाता है और ऊतकों के लिए कम आक्रामक होता है।14 इसके अलावा, तरल बायोप्सी प्राथमिक ट्यूमर ऊतक में मौजूद नहीं होने वाले घातक लक्षणों को दर्शा सकती है।सभी प्रकार के ट्यूमर के लिए नैदानिक ​​​​अभ्यास में अभी तक तरल बायोप्सी का परीक्षण नहीं किया जा रहा है, लेकिन कैंसर में उनकी नैदानिक ​​क्षमता ऑन्कोलॉजिस्ट का ध्यान आकर्षित कर रही है।16 द्रव बायोप्सी परिसंचारी ट्यूमर कोशिकाओं (सीटीसी), परिसंचारी ट्यूमर डीएनए (सीडीएनए), परिसंचारी मुक्त आरएनए (ईसीआरएनए), और एक्सोसोम का पता लगा सकती है।इस लेख में, हम उच्च जोखिम वाले एचसीसी समूहों की प्रारंभिक जांच में विभिन्न द्रव बायोप्सी तकनीकों की विशेषताओं, भूमिका और अनुप्रयोग पर चर्चा करेंगे।
स्वस्थ व्यक्तियों के रक्त के नमूनों में एक्स्ट्रासेलुलर डीएनए (cfDNA) का वर्णन पहली बार 1948 में मंडेल एट अल द्वारा किया गया था।17 cfDNA एक सेल-मुक्त डीएनए टुकड़ा है जिसकी लंबाई लगभग 160-180 बीपी है, जो मुख्य रूप से लिम्फोसाइटों और मायलोइड कोशिकाओं से उत्पन्न होती है।सीटीडीएनए ट्यूमर कोशिकाओं द्वारा परिधीय रक्त में जारी एक विशिष्ट उत्परिवर्ती डीएनए टुकड़ा है, जो नेक्रोसिस, एपोप्टोसिस और उत्सर्जन सहित कुछ पैथोफिजियोलॉजिकल प्रक्रियाओं के बाद ट्यूमर कोशिकाओं की जीनोमिक जानकारी का प्रतिनिधित्व करता है।कुल cfDNA में ctDNA का अनुपात ट्यूमर के प्रकार के साथ व्यापक रूप से भिन्न होता है, और cDNA के टुकड़े आमतौर पर लंबाई में 167 बीपी से कम होने की सूचना है।18 अंडरहिल के अध्ययन से पता चला है कि cfDNA के टुकड़े आम तौर पर सामान्य cfDNA से छोटे होते हैं। 19 स्वस्थ व्यक्तियों की तुलना में, कैंसर रोगियों के रक्त में cfDNA अंशों की कुल लंबाई कम होती है, इसलिए cfDNA को प्रारंभिक ट्यूमर स्क्रीनिंग के संकेतक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।cfDNA टुकड़े की लंबाई के कुछ सबसेट का संवर्धन गैर-मेटास्टेटिक ठोस ट्यूमर से जुड़े सीडीएनए का पता लगाने में सुधार कर सकता है।अध्ययनों से पता चला है कि ctDNA 75% से अधिक उन्नत अग्नाशय, बृहदान्त्र, मूत्राशय, जठरांत्र, यकृत, डिम्बग्रंथि, स्तन, मेलेनोमा और सिर और गर्दन के कैंसर में पाया जाता है।20,21 हालांकि, रक्त में ctDNA की मात्रा ट्यूमर के स्थान पर निर्भर करती है।22 बेट्टेगौड के एक अध्ययन में, कोलोरेक्टल, स्तन, यकृत, फेफड़े और प्रोस्टेट कैंसर के रोगियों में अन्य कैंसर की तुलना में उनके रक्त में सीडीएनए का उच्च स्तर पाया गया।इसके विपरीत, मुंह के कैंसर, अग्नाशय के कैंसर, गैस्ट्रिक कैंसर और ग्लियोमा के रोगियों में, रक्त में सीडीएनए की सांद्रता कम थी।इक्कीस
चूंकि सीटीडीएनए में प्राथमिक ट्यूमर कोशिकाओं के समान आनुवंशिक उत्परिवर्तन होते हैं, इसलिए सीडीएनए का उपयोग विषम ट्यूमर-विशिष्ट उत्परिवर्तन और एपिजेनेटिक परिवर्तनों का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, जिसमें मिथाइलेशन, हाइड्रोक्सीमेथाइलेशन, एकल न्यूक्लियोटाइड विविधताएं और प्रतिलिपि संख्या भिन्नताएं शामिल हैं।तेईस
डीएनए मिथाइलेशन सबसे आम एपिजेनेटिक परिवर्तनों में से एक है जिसके परिणामस्वरूप जीन दमन होता है।सामान्य कोशिकाओं की तुलना में, ट्यूमर सेल जीनोम के मिथाइलेशन के समग्र स्तर में अंतर होता है, विशेष रूप से ट्यूमर सप्रेसर जीन के मिथाइलेशन में, जिसे प्रारंभिक चरण में पता लगाया जा सकता है, यह सुझाव देता है कि डीएनए मेथिलिकरण में परिवर्तन प्रारंभिक अवस्था का संकेतक हो सकता है। ट्यूमरजेनिसिस का पता लगाना।एचसीसी से जुड़े ट्यूमर शमन जीन को प्रमोटर मिथाइलेशन द्वारा निष्क्रिय किया जा सकता है, जिससे ट्यूमरजेनिसिस को उत्तेजित किया जा सकता है।24 डीएनए मिथाइलेशन इसकी ऊतक विशिष्टता, पता लगाने की क्षमता और उम्र की स्वतंत्रता के कारण ट्यूमर के शुरुआती निदान के लिए एक आदर्श मार्कर है।इसके अलावा, डीएनए मेथिलिकरण दैहिक उत्परिवर्तन की तुलना में अधिक सामान्य है क्योंकि लक्ष्य जीनोम के प्रत्येक क्षेत्र में अधिक लक्षित क्षेत्र और कई परिवर्तित सीपीजी साइट हैं।25 कई CpG साइटों के अलावा, DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 और RGS10.26 Xu et al में ctDNA में बड़ी संख्या में स्वतंत्र हाइपरमेथिलेटेड लोकी की पहचान की गई है।1098 एचसीसी रोगियों से सीएफडीएनए नमूनों की तुलना और 835 स्वस्थ नियंत्रण एचसीसी से जुड़े जीन थे जो संबंधित प्लाज्मा सीडीएनए मेथिलिकरण हस्ताक्षरों के साथ दृढ़ता से सहसंबद्ध पाए गए थे।25 प्रयोगशाला विश्लेषण के आधार पर, एक भविष्य कहनेवाला मॉडल विकसित किया गया था जिसमें क्रमशः 85.7% और 94.3% की संवेदनशीलता और विशिष्टता के साथ 10 मिथाइलेशन मार्कर शामिल थे, और ये मार्कर ट्यूमर द्रव्यमान, ट्यूमर चरण और उपचार की प्रतिक्रिया के साथ अत्यधिक सहसंबद्ध थे।इन परिणामों से संकेत मिलता है कि सीडीएनए मिथाइलेशन मार्करों का उपयोग एचसीसी के निदान, निगरानी और रोग का निदान करने में बहुत बड़ा वादा करता है।लू एट अल द्वारा प्रस्तुत तीन असामान्य रूप से मिथाइलेटेड जीन (APC, COX2, RASSF1A) और एक miRNA (miR203) से युक्त मिथाइलेशन मॉडल में, HBV से जुड़े HCC के निदान के लिए मॉडल 27 की संवेदनशीलता और विशिष्टता तुलनीय थी।80%।इसके अलावा, मॉडल 20 एनजी/एमएल के एएफपी स्तर के साथ 75% अनियंत्रित एचसीसी रोगियों का पता लगा सकता है।रास से जुड़े डोमेन परिवार 1A प्रोटीन (RASSF1A) के लिए जीन मानव जीनोम में मुख्य दोहराव वाला डीएनए अनुक्रम है।अरुजो एट अल।ने निष्कर्ष निकाला कि RASSF1A प्रमोटर का हाइपरमेथिलेशन HCC की शुरुआती जांच और एपिजेनेटिक थेरेपी के लिए संभावित आणविक लक्ष्य के लिए एक मूल्यवान बायोमार्कर हो सकता है।28 एक अध्ययन में, एचसीसी वाले 73.3% रोगियों में सीरम RASSF1A प्रमोटर हाइपरमेथिलेशन पाया गया।29 लंबे प्रतिच्छेदित न्यूक्लियोटाइड तत्व 1 (लाइन-1) एक अन्य अत्यधिक सक्रिय रेट्रोट्रांसपोजिशन मध्यस्थ है।LINE-1 का हाइपोमेथिलेशन HCC सीरम नमूनों के 66.7% डीएनए में पाया गया था और यह प्रारंभिक पुनरावृत्ति और कट्टरपंथी लकीर के बाद खराब अस्तित्व से जुड़ा था।29 हाइपरमेथिलेशन एक सामान्य आनुवंशिक प्रक्रिया है जो लीवर सिरोसिस और एचसीसी के विकास में एक अनूठी भूमिका निभाती है।इसके विपरीत, हाइड्रॉक्सीमेथाइलेशन एक डीमेथिलेशन प्रक्रिया है जो जीन पुनर्सक्रियन और अभिव्यक्ति को प्रेरित करती है, और इस प्रक्रिया में 5-हाइड्रॉक्सीमिथाइलसिटोसिन (5-एचएमसी) उत्पाद का पता लगाने का उपयोग ट्यूमर की पहचान करने के लिए किया जा सकता है।सीडीएनए के मिथाइलेशन और हाइड्रॉक्सीमेथिलेशन ट्यूमरजेनिसिस से जुड़े हैं और एचसीसी की शुरुआती जांच में योगदान कर सकते हैं।2554 विषयों के एक अध्ययन में, सीएफडीएनए नमूनों में 31 जीनोम-वाइड 5-एचएमसी पाए गए, और एचसीसी रोगियों में 5-एचएमसी अनुक्रमों की तुलना करके 32 जीनों की पहचान की गई और उच्च जोखिम वाले समूहों जैसे कि पुरानी बीमारियों वाले।जिगर की बीमारियों के नैदानिक ​​मॉडल।और सिरोसिस।यह मॉडल एचसीसी को गैर-ट्यूमर ऊतक से अलग करने में एएफपी से बेहतर था।
कोडिंग क्षेत्रों में उत्परिवर्तन से ट्रांसक्रिप्शनल असामान्यताएं हो सकती हैं, जिससे प्रोटीन अनुक्रम और अंततः कैंसर में परिवर्तन हो सकता है।एकल न्यूक्लियोटाइड वेरिएंट उनकी उच्च ऊतक विश्वसनीयता और उच्च ट्यूमर और ऊतक विशिष्टता के कारण प्रारंभिक ट्यूमर स्क्रीनिंग के लिए महत्वपूर्ण जीनोमिक मार्कर हैं।कैंसर के एक्सोम और पूरे जीनोम अनुक्रमण के लिए अगली पीढ़ी के अनुक्रमण (एनजीएस) का उपयोग करते हुए कई एचसीसी-संबंधित अध्ययनों ने सामान्य उत्परिवर्तित सेलुलर जीन जैसे टीपी 53 और सीटीएनएनबी 1 की पहचान की है, साथ ही एआरआईडी 1 ए, एमएलएल, आईआरएफ 2 सहित कई।नए जीन, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 और JAK1 मध्यम उत्परिवर्तन दर दिखाते हैं। म्यूटेंट जीन फंक्शन विश्लेषण से पता चलता है कि क्रोमेटिन रीमॉडेलिंग, Wnt / β-कैटेनिन और JAK / STAT सिग्नल ट्रांसडक्शन, P53-सेल साइकल पाथवे, एपिजेनेटिक मॉडिफायर, ऑक्सीडेटिव स्ट्रेस पाथवे, PI3K / AKT / MTOR पाथवे और RAS / RAF / में परिवर्तन। MAPK kinase पाथवे एचसीसी ऑन्कोजेनेसिस में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। 32,33 एक अध्ययन में जिसमें ट्यूमर से जुड़े उत्परिवर्तन का पता चला था, हुआंग एट अल ने पाया कि ctDNA पर निर्भर ट्यूमर से जुड़े उत्परिवर्तन की आवृत्ति 19.5% थी, और विशिष्टता 90% थी। .34 इसके अलावा, जिन रोगियों ने संवहनी आक्रमण का अनुभव किया, उनमें ctDNA उत्परिवर्तन ( P = 0.041) और कम पुनरावृत्ति-मुक्त अस्तित्व ( P <0.001) होने की संभावना अधिक थी। म्यूटेंट जीन फंक्शन विश्लेषण से पता चलता है कि क्रोमेटिन रीमॉडेलिंग, Wnt / β-कैटेनिन और JAK / STAT सिग्नल ट्रांसडक्शन, P53-सेल साइकल पाथवे, एपिजेनेटिक मॉडिफायर, ऑक्सीडेटिव स्ट्रेस पाथवे, PI3K / AKT / MTOR पाथवे और RAS / RAF / में परिवर्तन। MAPK kinase पाथवे एचसीसी ऑन्कोजेनेसिस में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। 32,33 एक अध्ययन में जिसमें ट्यूमर से जुड़े उत्परिवर्तन का पता चला था, हुआंग एट अल ने पाया कि ctDNA पर निर्भर ट्यूमर से जुड़े उत्परिवर्तन की आवृत्ति 19.5% थी, और विशिष्टता 90% थी। .34 इसके अलावा, जिन रोगियों ने संवहनी आक्रमण का अनुभव किया, उनमें ctDNA उत्परिवर्तन ( P = 0.041) और कम पुनरावृत्ति-मुक्त अस्तित्व ( P <0.001) होने की संभावना अधिक थी।म्यूटेंट जीन फंक्शन विश्लेषण से पता चलता है कि क्रोमेटिन रीमॉडेलिंग, Wnt / β-कैटेनिन और JAK / STAT सिग्नलिंग, P53 सेल साइकल पाथवे, एपिजेनेटिक मॉडिफायर, ऑक्सीडेटिव स्ट्रेस पाथवे, PI3K / AKT / MTOR पाथवे, और RAS / RAF / MAPK kinase पाथवे प्ले में परिवर्तन एचसीसी ट्यूमरजेनिसिस में एक महत्वपूर्ण भूमिका। 32,33 एक अध्ययन में जिसमें ट्यूमर से जुड़े उत्परिवर्तन पाए गए, हुआंग एट अल।पाया गया कि ctDNA पर निर्भर ट्यूमर से जुड़े म्यूटेशन की आवृत्ति 19.5% थी और विशिष्टता 90% थी।.34 पहले, यू ациентов с сосудистой инвазией аще встречались мутации цДНК (P=0,041) और болееватаяие. .34 इसके अलावा, संवहनी आक्रमण वाले रोगियों में अधिक सीडीएनए म्यूटेशन (पी = 0.041) और एक कम रोग-मुक्त अस्तित्व ( पी <0.001) था।उत्परिवर्ती जीनों के कार्यात्मक विश्लेषण से क्रोमेटिन रीमॉडेलिंग, Wnt / cat-catenin और JAK / STAT सिग्नलिंग, P53 सेल साइकल पाथवे, एपिजेनेटिक संशोधक, ऑक्सीडेटिव स्ट्रेस पाथवे, PI3K / AKT / MTOR पाथवे और RAS / RAF / MAPK का पता चला। काइनेज पाथवे एचसीसी के ऑन्कोजेनेसिस में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। 32,33 हुआंग ctDNA 的频率为19.5%，特异性为90% .34 ctDNA突变（पी=0.041）和更短的无复发生存期（पी<0.001）。 32:33 पी<0.001）。32,33 एक अध्ययन में जिसमें ट्यूमर से जुड़े उत्परिवर्तन पाए गए, हुआंग एट अल।पाया गया कि ट्यूमर से जुड़े उत्परिवर्तन 19.5% थे जो 90% 34 की विशिष्टता के साथ सीडीएनए पर निर्भर थे। इसके अलावा, जिन रोगियों में संवहनी आक्रमण हुआ था, उनमें सीडीएनए विकसित होने की अधिक संभावना थी।мутация (पी = 0,041) और олее короткая езрецидивная выживаемость (पी <0,001)। उत्परिवर्तन ( पी = 0.041) और कम रोग मुक्त अस्तित्व ( पी <0.001)।एक अन्य सामान्य HCC चालक जीन TP53 है, जिसकी उत्परिवर्तन दर 30% से अधिक है।अध्ययनों से पता चला है कि रक्त और मूत्र में ctDNA में TP53 उत्परिवर्तन की आवृत्ति 5% से 60% तक होती है।35 जोहान के अध्ययन से पता चला है कि देर से एचसीसी में सीटीडीएनए उत्परिवर्तन स्पेक्ट्रम में प्रारंभिक एचसीसी के समान उत्परिवर्तन दर है, जिसमें टीईआरटी प्रमोटर (51%), टीपी 53 (32%), सीटीएनएनबी 1 (17%), पीटीईएन (8%), उत्परिवर्तन शामिल हैं। AXIN1., ARID2, KMT2D और TSC2 (प्रत्येक 6%)।36 β-कैटेनिन (CTNNB1) ऑन्कोजीन Wnt सिग्नलिंग मार्ग में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है।प्रतिलेखन संयोजक CTNNB1 जीन अभिव्यक्ति को बढ़ावा दे सकता है, जिससे कोशिका प्रसार, एपोप्टोसिस का निषेध और एंजियोजेनेसिस हो सकता है।CTNNB1 हेपेटोसाइट परिवर्तन को प्रेरित करने के लिए टीईआरटी के साथ बातचीत भी कर सकता है।33 टीईआरटी प्रमोटर अक्सर कुछ ठोस ट्यूमर में उत्परिवर्तित होता है।टीईआरटी में परिवर्तन, एचसीसी के घातक परिवर्तन में सबसे शुरुआती आनुवंशिक परिवर्तनों में से एक, सिरोथिक हेपेटोसाइट्स में टेलोमेरेज़ पुनर्सक्रियन का कारण बन सकता है और प्रसार को बढ़ावा दे सकता है और उम्र बढ़ने को रोक सकता है।33-37 टीईआरटी प्रमोटर में उत्परिवर्तन 59-90% रोगियों में प्रोलिफेरेटिव लीवर नोड्यूल और प्रारंभिक एचसीसी के साथ होने की सूचना मिली है और जीवित रहने से जुड़े हैं।38
प्रतिलिपि संख्या परिवर्तन (CNA) दैहिक उत्परिवर्तन का एक महत्वपूर्ण उपप्रकार है।अनुसंधान से पता चला है कि CNA का व्यापक और फोकल बोझ एक जीनोमिक हस्ताक्षर है जो कुछ प्रकार के कैंसर में ट्यूमर प्रतिरक्षा घुसपैठ और बहिष्करण की भविष्यवाणी करने में सक्षम है।39 सक्रिय घुसपैठ संकेतन, उच्च साइटोलिटिक गतिविधि, गंभीर सूजन और एचसीसी में एंटीजन प्रस्तुति से जुड़े आनुवंशिक मार्कर।477 विषयों में एकल न्यूक्लियोटाइड बहुरूपताओं के डेटा सरणी के विश्लेषण से सीएनएस पर कम बोझ का पता चला।इसके विपरीत, उच्च व्यापक CNA भार वाले गुणसूत्रीय रूप से अस्थिर ट्यूमर ने प्रतिरक्षा अस्वीकृति के लक्षण दिखाए और प्रसार, डीएनए मरम्मत और TP53 शिथिलता से जुड़े थे।जू एट अल।ने दिखाया कि एचसीसी समूह में क्रोनिक लीवर रोग समूह की तुलना में अधिक सीएनए स्कोर था।40 एकल कोशिका के पूरे-जीनोम अनुक्रमण का उपयोग करते हुए, CNAs को हेपेटोकार्सिनोजेनेसिस में जल्दी प्रकट होना और ट्यूमर की प्रगति के दौरान अपेक्षाकृत स्थिर रहना पाया गया।41 चुंग एट अल।पाया गया कि एचसीसी रोगियों में सीएफडीएनए का स्तर काफी ऊंचा हो गया था और सीएफडीएनए में जीनोम-वाइड सीएनए सॉराफेनीब के साथ इलाज किए गए एचसीसी रोगियों में एक महत्वपूर्ण स्वतंत्र रोगसूचक मार्कर थे।42 उच्च CNA बोझ वाले रोगियों में कम CNA बोझ वाले रोगियों की तुलना में रोग के बढ़ने और मृत्यु होने की संभावना अधिक थी।ओलेरिच एट अल।पाया गया कि कैंसर रोगियों के cfDNA में CNA का आकलन करने के लिए कॉपी नंबर अस्थिरता सूचकांक (CNI) का उपयोग किया जा सकता है।उन्होंने नोट किया कि उन्नत कैंसर वाले रोगियों में एक नियंत्रण समूह की तुलना में काफी अधिक सीएनआई स्कोर था, जो प्रणालीगत कीमोथेरेपी और इम्यूनोथेरेपी के लिए रोगी की प्रतिक्रिया का आकलन करता है।43 इन परिणामों से पता चलता है कि तरल बायोप्सी नमूनों में पाए जाने वाले CNA उन्नत कैंसर के रोगियों में रोगसूचक संकेतक के रूप में काम कर सकते हैं।प्रणालीगत चिकित्सा की पृष्ठभूमि पर एचसीसी।
वर्तमान में, ctDNA का पता लगाने के लिए उपयोग की जाने वाली विधियों को लक्षित और गैर-लक्षित विधियों में विभाजित किया जा सकता है।संक्षेप में, डिजिटल पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (डीपीसीआर), बीमिंग डिजिटल पीसीआर, एम्प्लीफिकेशन रेफ्रेक्ट्री म्यूटेशन सिस्टम-पीसीआर, कैप-सेक और टैम-सेक जैसी लक्षित विधियां पूर्वनिर्धारित जीनों के प्रति अत्यधिक संवेदनशील हैं।संपूर्ण जीनोम अनुक्रमण और NGS जैसी लक्ष्य-रहित विधियाँ संपूर्ण जीनोमिक परिदृश्य का एक व्यापक दृष्टिकोण प्रदान करती हैं।44 लक्ष्य पैनलों की तुलना में, संपूर्ण जीनोम अनुक्रमण न केवल बिंदु उत्परिवर्तन और सम्मिलन का पता लगा सकता है, बल्कि पुनर्व्यवस्था और प्रतिलिपि संख्या विविधता भी कर सकता है।पूर्वानुमान, और सीटीसी और सीएफडीएनए अच्छे संकेतक हैं जिनका उपयोग एचसीसी की गतिशील निगरानी के लिए किया जा सकता है।45 इसके अलावा, सीएफडीएनए विश्लेषण एचसीसी का पता लगाने में अधिक उपयोगी हो सकता है।यान एट अल।ने दिखाया कि एचसीसी वाले रोगियों के प्लाज्मा में सीएफडीएनए लीवर फाइब्रोसिस और स्वस्थ नियंत्रण वाले रोगियों की तुलना में काफी अधिक था।एएफपी की तुलना में, प्रारंभिक एचसीसी के लिए सीटीडीएनए एक बेहतर स्क्रीनिंग मार्कर होने की उम्मीद है।46 आबादी की आबादी में cfDNA और प्रोटीन का परीक्षण करने वाली 47 तरल बायोप्सी के एक संभावित अध्ययन में, उन्हें एचसीसी के बिना रोगियों से एचसीसी के रोगियों को अलग करने में प्रभावी दिखाया गया।331 अल्ट्रासाउंड सामान्य और एएफपी-नकारात्मक रोगियों के अनुवर्ती में, एचसीसी के निदान के लिए सीएफडीएनए की संवेदनशीलता और विशिष्टता क्रमशः 100% और 94% थी, इसलिए सीडीएनए स्पर्शोन्मुख HBsAg सेरोपोसिटिव व्यक्तियों में एचसीसी का पता लगा सकता है।Yeo48 अध्ययन में, HCC के रोगियों में RASSF1A प्रमोटर के हाइपरमेथिलेशन की एक उच्च आवृत्ति (92.5%) पाई गई।इसके अलावा, जू एट अल।क्रमशः 90.5% और 83.3% की विशिष्टता और संवेदनशीलता के साथ विशिष्ट मिथाइलेशन मार्करों के एक पैनल का उपयोग करके एचसीसी की भविष्यवाणी करने के लिए एक नैदानिक ​​​​मॉडल बनाया।पैनल एचसीसी के रोगियों को अन्य जिगर की बीमारियों के रोगियों से अलग करने की अनुमति देता है, जो एएफपी से बेहतर है।उन्होंने यह भी पाया कि सकारात्मक परीक्षण करने वाले सामान्य नियंत्रणों में एचसीसी के लिए जोखिम कारक हो सकते हैं, जैसे एचबीवी संक्रमण या शराब के उपयोग का इतिहास।25 हम परिकल्पना करते हैं कि एचसीसी के लिए उच्च जोखिम वाले कारक सीएफडीएनए के हाइपरमेथिलेशन को बढ़ावा दे सकते हैं, जो तब एचसीसी की प्रगति में योगदान देता है, और इस प्रकार सीएफडीएनए उच्च जोखिम वाले समूहों के लिए स्क्रीनिंग में महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकता है।कै एट अल।ctDNA म्यूटेशन की पूरी श्रृंखला को संक्षेप में प्रस्तुत करें और रोगियों में ट्यूमर के बोझ का आकलन करने के लिए एक मजबूत रणनीति की पेशकश करें।49 यह रणनीति इमेजिंग परिवर्तन से पहले 4.6 महीने के माध्यिका ट्यूमरजेनिसिस की पहचान कर सकती है और सीरम बायोमार्कर एएफपी, एएफपी-एल3 और पीआईवीकेए-द्वितीय की तुलना में बेहतर नैदानिक ​​प्रदर्शन दिखाया है।छवि मूल्यांकन उपलब्ध नहीं होने पर सीडीएनए परीक्षण के नैदानिक ​​​​मूल्य का प्रदर्शन किया गया है, इसलिए उच्च जोखिम वाले समूहों में प्रारंभिक एचसीसी के निदान में सीडीएनए परीक्षण मूल्य का है।हाल ही में, वैज्ञानिकों ने 3204 नैदानिक ​​नमूनों और cfDNA में बहुभिन्नरूपी आनुवंशिक भिन्नता (5-हाइड्रॉक्सीमिथाइलसिटोसिन, 5′-मोटिफ, विखंडन, न्यूक्लियोसोम ट्रेस, HIFI सहित) के संकेतकों का विश्लेषण करने के लिए NGS तकनीक का उपयोग किया।तीन स्वतंत्र ट्रेन, परीक्षण और परीक्षण सेट के साथ 50 पुन: सत्यापित HIFI मॉडल ने HCC और गैर-HCC आबादी के बीच स्थिर और विश्वसनीय भेदभाव दिखाया, क्रमशः HCC-विशिष्ट परीक्षण और परीक्षण सेट में 95.79% और 95.42% संवेदनशीलता के साथ।लिंग क्रमशः 95.00% और 97.83% थे।एचआईएफआई पद्धति का नैदानिक ​​मूल्य एचसीसी को सिरोसिस से अलग करने में एएफपी की तुलना में अधिक है।इसके अलावा, ctDNA का उपयोग सर्जिकल उपचार में भी किया जाता है।अत्सुशी एट अल।एचसीसी के रोगियों में सीटीडीएनए के प्रीऑपरेटिव सीरम स्तर को निर्धारित किया और पाया कि सीडीएनए सकारात्मक समूह में पुनरावृत्ति दर और अतिरिक्त मेटास्टेसिस दर सीडीएनए नकारात्मक समूह की तुलना में काफी अधिक थी, और सीडीएनए स्तर काफी सहसंबद्ध थे।ट्यूमर की प्रगति के साथ।51 अत्यधिक संवेदनशील बायोमार्कर होने के कारण, ctDNA जहाजों पर आक्रमण करने के लिए HCC की क्षमता का अनुमान लगा सकता है।वांग एट अल।एचसीसी के साथ 46 रोगियों के पूरे जीनोम अनुक्रमण का प्रदर्शन किया, और बहुभिन्नरूपी विश्लेषण से पता चला कि माइक्रोवेसल्स में आक्रमण के लिए सीडीएनए संस्करण की एलील आवृत्ति का दहलीज मूल्य 0.83%, संवेदनशीलता 89.7% और विशिष्टता 80.0% है।शोधनीय एचसीसी में माइक्रोवैस्कुलर आक्रमण के लिए एक स्वतंत्र जोखिम कारक, यह सुझाव देता है कि सीडीएनए इष्टतम उपचार को निर्देशित करने में मदद कर सकता है।अंत में, सीटीडीएनए एचसीसी की घटना और विकास में पूरी तरह से फंसा हुआ है और इसका उपयोग प्रारंभिक जांच, शल्य चिकित्सा मूल्यांकन और रोग निगरानी के लिए किया जा सकता है।
सीटीसी प्राथमिक ट्यूमर या मेटास्टेस से व्युत्पन्न घातक कोशिकाएं हैं जो रक्तप्रवाह में मेटास्टेसाइज करती हैं।ट्यूमर कोशिकाएं मैट्रिक्स मेटालोप्रोटीनिस (एमएमपी) का स्राव करती हैं, जो तहखाने की झिल्ली को तोड़ती हैं, जिससे ट्यूमर कोशिकाएं सीधे रक्त और लसीका वाहिकाओं में प्रवेश करती हैं।हालांकि, एनोइकिस, प्रतिरक्षा हमले, या कतरनी तनाव से अधिकांश सीटीसी तेजी से समाप्त हो जाते हैं।53 उपकला-मेसेनकाइमल संक्रमण (ईएमटी) सीटीसी को प्राथमिक ट्यूमर ऊतक से आसानी से अलग करने, केशिकाओं पर आक्रमण करने और महत्वपूर्ण रूप से बेहतर अस्तित्व, मेटास्टेसिस, आक्रमण और दवा प्रतिरोध प्राप्त करने की अनुमति देता है।अध्ययनों से पता चला है कि प्राथमिक मेटास्टेटिक ट्यूमर में विभिन्न ट्यूमर कोशिकाओं के बीच गहन विविधता है।इस प्रकार, सीटीसी विश्लेषण से ट्यूमर सेल विषमता की व्यापक समझ हो सकती है।54
HCC से जुड़े CTCs के लिए विशिष्ट मार्करों में ग्लाइपिकन -3 (GPC3), एसियालोग्लाइकोप्रोटीन रिसेप्टर (ASGPR), एपिथेलियल सेल आसंजन अणु (EpCAM) और स्टेम सेल से जुड़े मार्कर जैसे CD44, CD90, 55 और इंटरसेलुलर आसंजन अणु 1 (ICAM1) शामिल हैं।) .56 GPC3 मार्कर एक कोशिका झिल्ली-एंकरयुक्त प्रोटीन है जो नैदानिक ​​रूप से HCC के रोग संबंधी विश्लेषण और लक्षण वर्णन के लिए उपयोग किया जाता है।57 जीपीसी3 की अभिव्यक्ति एचसीसी ट्यूमर कोशिकाओं में मध्यवर्ती और कम विभेदन के साथ अधिक सामान्य है और अतिरिक्त प्रवास को बढ़ावा देती है;इसके अलावा, GPC3+ CTCs की उपस्थिति मेटास्टेटिक HCC को इंगित करती है।58 एएसजीपीआर एक ट्रांसमेम्ब्रेन प्रोटीन है जो केवल हेपेटोसाइट्स की सतह पर व्यक्त किया जाता है और अच्छी तरह से विभेदित एचसीसी में अत्यधिक व्यक्त किया जाता है।एपकैम सीटीसी पर कब्जा करने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले झिल्ली से जुड़े प्रोटीनों में से एक है।एपकैम को स्टेम सेल विशेषताओं के साथ एचसीसी कोशिकाओं के एक सतह मार्कर के रूप में पहचाना गया है, जो एचसीसी की विभिन्न क्लिनिकोपैथोलॉजिकल विशेषताओं से संबंधित है, जैसे कि संवहनी आक्रमण, एएफपी स्तर का आकलन, और बार्सिलोना अस्पताल (बीसीएलसी) में यकृत कैंसर का उन्नत चरण।60 सीटीसी ईएमटी फेनोटाइप अत्यधिक मेटास्टेटिक है।सीटीसी में 54 ईएमटी प्रक्रियाएं एचसीसी मेटास्टेसिस को बढ़ावा देती हैं।ईएमटी मार्करों की अभिव्यक्ति जैसे कि विमेंटिन, ट्विस्ट, ई-बॉक्स जिंक फिंगर बाइंडिंग (ZEB) 1, ZEB2, घोंघा, स्लग, और E-Cadherin का अध्ययन HCC रोगियों से लीवर-व्युत्पन्न CTCs में किया गया है।58 चेंग [61] द्वारा विकसित CanPatrol ™ प्रणाली ने मुख्य रूप से व्यक्त मार्करों के आधार पर CTCs को तीन फेनोटाइपिक उपसमूहों में वर्गीकृत किया: एपिथेलियल फेनोटाइप (EpCAM, CK8/18/19), मेसेनकाइमल फेनोटाइप (विमेंटिन, कॉइल्ड), और मिश्रित फेनोटाइप।176 रोगियों में, एचसीसी को सौम्य यकृत रोग से अलग करने में कुल सीटीसी एएफपी से बेहतर था।कुल CTC, AFP और संयुक्त कुल CTC और AFP के लिए AUC मान 0.774 (95% CI, 0.704–0.834), 0.669 (95% CI, 0.587–0.750), और 0.821 (95% CI, 0.756–0.886) थे। )), क्रमश।ईएमटी पर आधारित सीटीसी वर्गीकरण एचसीसी निदान, प्रारंभिक पुनरावृत्ति, मेटास्टेसिस और कम समग्र समय की भविष्यवाणी कर सकता है।
वर्तमान में, सीएससी का पता लगाने के तरीकों में भौतिक तरीके और जैविक तरीके शामिल हैं।भौतिक विधियों, जिन्हें अक्सर जैव-भौतिक गुणों के आधार पर संवर्धन के रूप में संदर्भित किया जाता है, मुख्य रूप से सीएससी के भौतिक गुणों, जैसे आकार, घनत्व, आवेश, गतिशीलता और विकृति पर निर्भर करते हैं।भौतिक गुणों के आधार पर, विभिन्न तरीके हैं जैसे निस्पंदन-आधारित सिस्टम, डाइइलेक्ट्रोफोरेसिस, आदि। उत्तरार्द्ध, जिसे इम्यूनोफिनिटी-आधारित संवर्धन के रूप में भी जाना जाता है, मुख्य रूप से एंटीजन-एंटीबॉडी बाइंडिंग पर आधारित है क्योंकि यह विधि ट्यूमर-विशिष्ट बायोमार्कर के खिलाफ एंटीबॉडी का उपयोग करती है। जैसे कि एपकैम, एएसजीपीआर, ह्यूमन एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर रिसेप्टर 2 (एचईआर 2), प्रोस्टेट स्पेसिफिक एंटीजन (पीएसए), ह्यूमन पैन्सीटोकैटिन (पी-सीके) और कार्बामॉयल फॉस्फेट सिंथेज़ 1 (सीपीएस1)।62 एक अन्य प्रकार, जिसे गैर-संवर्धन विधि कहा जाता है, उच्च परमाणु-से-साइटोप्लाज्मिक अनुपात और आकार के आधार पर ल्यूकोसाइट्स से सीटीसी को अलग करने के लिए फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करता है।वर्तमान में, सीटीसी का पता लगाने के लिए एफडीए द्वारा अनुमोदित एकमात्र परीक्षण सेल-सर्च ™ सिस्टम है, जो एपकैम सेल सतह मार्कर का उपयोग करता है। हालांकि, संयुक्त मार्कर-आधारित सीटीसी का पता लगाने से सकारात्मकता दर में वृद्धि हो सकती है। 54 एएसजीपीआर और सीपीएस1 के खिलाफ एंटीबॉडी के मिश्रण ने एचसीसी रोगियों में 91% की सीटीसी पहचान दर हासिल की। ​​63 झांग एट अल ने एएसजीपीआर, पी के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ सीटीसी-चिप का इस्तेमाल किया। -सीके और सीपीएस1, और सौम्य जिगर की बीमारी या गैर-एचसीसी कैंसर वाले एचसीसी रोगियों से 100% की दर से विभेदित। 64 वांग के एक अध्ययन ने 42 एचसीसी रोगियों में से 60% में एपकैम + सीटीसी का पता लगाया और दोनों सकारात्मकता के बीच महत्वपूर्ण सहसंबंध पाया। दर और टीएनएम चरण के साथ सीटीसी की संख्या। 65 गुओ एट अल ने पाया कि सीटीसी-व्युत्पन्न पीसीआर स्कोर 125/171 (73%) रोगियों में ऊंचा था, जिनका एएफपी स्तर 72.5% की संवेदनशीलता के साथ <20 एनजी / एमएल था और ए 95.0% की विशिष्टता, 57.0% और 90.0% की तुलना में एक कटऑफ पर एएफपी के लिए 20 एनजी/एमएल।66 एएफपी और सीटीसी के संयोजन से एचसीसी का पता लगाने में सुधार हो सकता है। 45 यह माना जाता है कि समूहों की शुरुआती जांच में एएफपी पर सीटीसी का एक फायदा है। एचसीसी के लिए उच्च जोखिम में। हालांकि, संयुक्त मार्कर-आधारित सीटीसी का पता लगाने से सकारात्मकता दर में वृद्धि हो सकती है। 54 एएसजीपीआर और सीपीएस1 के खिलाफ एंटीबॉडी के मिश्रण ने एचसीसी रोगियों में 91% की सीटीसी पहचान दर हासिल की। ​​63 झांग एट अल ने एएसजीपीआर, पी के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ सीटीसी-चिप का इस्तेमाल किया। -सीके और सीपीएस1, और सौम्य जिगर की बीमारी या गैर-एचसीसी कैंसर वाले एचसीसी रोगियों से 100% की दर से विभेदित। 64 वांग के एक अध्ययन ने 42 एचसीसी रोगियों में से 60% में एपकैम + सीटीसी का पता लगाया और दोनों सकारात्मकता के बीच महत्वपूर्ण सहसंबंध पाया। दर और टीएनएम चरण के साथ सीटीसी की संख्या। 65 गुओ एट अल ने पाया कि सीटीसी-व्युत्पन्न पीसीआर स्कोर 125/171 (73%) रोगियों में ऊंचा था, जिनका एएफपी स्तर 72.5% की संवेदनशीलता के साथ <20 एनजी / एमएल था और ए 95.0% की विशिष्टता, 57.0% और 90.0% की तुलना में एक कटऑफ पर एएफपी के लिए 20 एनजी/एमएल।66 एएफपी और सीटीसी के संयोजन से एचसीसी का पता लगाने में सुधार हो सकता है। 45 यह माना जाता है कि समूहों की शुरुआती जांच में एएफपी पर सीटीसी का एक फायदा है। एचसीसी के लिए उच्च जोखिम में।हालांकि, सीटीसी की मार्कर-आधारित संयुक्त पहचान सकारात्मक परिणामों के प्रतिशत में वृद्धि कर सकती है। 54 एंटी-एएसजीपीआर और सीपीएस1 एंटीबॉडी के मिश्रण ने एचसीसी के रोगियों में 91% की सीटीसी पहचान दर हासिल की। ​​63 झांग एट अल।एएसजीपीआर, पी-सीके और सीपीएस1 के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ एक सीटीसी-चिप का इस्तेमाल किया, और एचसीसी वाले रोगियों को सौम्य यकृत रोग या गैर-एचसीसी से 100% की दर से अलग किया।частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге рупп. आवृत्ति और टीएनएम चरण के साथ सीटीसी की संख्या। 65 गुओ एट अल ने पाया कि सीटीसी से प्राप्त पीसीआर को 125/171 (73%) रोगियों में ऊंचा किया गया था, जिनके एएफपी स्तर <20 एनजी / एमएल थे, जिनकी संवेदनशीलता 72.5% और विशिष्टता थी 20 एनजी/एमएल के कट-ऑफ स्तर पर एएफपी के लिए 57.0% और 90.0% की तुलना में 95.0%। एएफपी और सीटीसी के संयोजन से एचसीसी की पहचान में सुधार हो सकता है। 45 सीटीसी को प्रारंभिक जांच में एएफपी पर एक फायदा माना जाता है। समूह।एचसीसी के उच्च जोखिम के साथ।हालांकि, सीटीसी की मार्कर-आधारित संयुक्त पहचान सकारात्मक परिणामों के प्रतिशत को बढ़ा सकती है।54 एंटी-एएसजीपीआर और सीपीएस1 एंटीबॉडी के मिश्रण ने एचसीसी के रोगियों में 91% सीटीसी का पता लगाने की दर हासिल की।63 झांग एट अल।एएसजीपीआर, पी-सीके और सीपीएस1 के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ सीटीसी चिप्स का इस्तेमाल किया और 100% के साथ सौम्य यकृत रोग और गैर-एचसीसी से एचसीसी के साथ प्रतिष्ठित रोगियों।64 वांग के अध्ययन ने 42 एचसीसी रोगियों में 60% एपकैम + सीटीसी की पहचान की और टीएनएम चरण में घटनाओं और सीटीसी की संख्या के बीच एक महत्वपूर्ण संबंध पाया। 65 गुओ एएफपी 水平<20 एनजी/एमएल 的125/171 (73%) 名患者中，सीटीसी पीसीआर 评分升高，敏感性为72.5%，特异性为95.0%，而एएफपी值为20 एनजी/एमएल 时的特异性为57.0% 90.0%。 65 गुओ <20 एनजी/एमएल 的 125/171 (73%) 20ng/एमएल 57.0% 和90.0%。65 गुओ एट अल।обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки ецифичность составляла 20 нг/мл. पाया गया कि 125/171 (73%) रोगियों में एएफपी स्तर <20 एनजी/एमएल, सीटीसी-व्युत्पन्न पीसीआर मूल्यों को 72.5% की संवेदनशीलता और 95.0% की विशिष्टता के साथ ऊंचा किया गया था, जबकि एएफपी कट-ऑफ विशिष्टता पर था। 20 एनजी/एमएल था।एमएल 57.0% और 90.0% था।66 ओआरपी और सीटीसी के संयोजन से एचसीसी की पहचान में सुधार होता है।उच्च जोखिम वाली एचसीसी आबादी की प्रारंभिक जांच में 45 सीटीसी को एएफपी से बेहतर माना जाता है।इस प्रकार, सीटीसी-पॉजिटिव और उच्च-जोखिम वाले एचसीसी समूहों के लिए, सीटीसी परीक्षण को नियमित रूप से अल्ट्रासाउंड और एएफपी डिटेक्शन के साथ जोड़ा जाना चाहिए।हालांकि, सीटीसी को ट्यूमर मेटास्टेसिस और पुनरावृत्ति के महत्वपूर्ण भविष्यवक्ता माना जाता है, और सीटीसी का पता लगाने की स्वतंत्र रूप से नैदानिक ​​​​उपकरण के रूप में अनुशंसा नहीं की जाती है।62 इसलिए, सीटीसी वर्तमान में उपयोग किए जाने वाले अन्य मार्करों की तुलना में बेहतर भविष्य कहनेवाला बायोमार्कर के रूप में काम कर सकता है। झोउ एट अल ने पाया कि एपकैम + सीटीसी और नियामक टी कोशिकाओं की उच्च संख्या वाले रोगियों ने एचसीसी पुनरावृत्ति विकसित करने का एक उच्च जोखिम दिखाया, सीटीसी की कम संख्या वाले लोगों की तुलना में, 66.7% बनाम 10.3% (पी <0.001) के पुनरावृत्ति अनुपात के साथ। 67 झोंग एट अल द्वारा इसी तरह के एक अध्ययन की सूचना दी गई थी। 68 इसके अलावा, क्यूई ने पाया कि एचसीसी वाले 112 रोगियों में से 101 (90.81%), जिनमें प्रारंभिक चरण की बीमारी वाले लोग भी शामिल थे, सीटीसी के लिए सकारात्मक थे और 3 के बाद बहुत छोटे एचसीसी नोड्यूल्स का पता चला था। अनुवर्ती के 5 महीने तक। झोउ एट अल ने पाया कि एपकैम + सीटीसी और नियामक टी कोशिकाओं की उच्च संख्या वाले रोगियों ने एचसीसी पुनरावृत्ति विकसित करने का एक उच्च जोखिम दिखाया, जिसमें सीटीसी की कम संख्या के साथ 66.7% बनाम 10.3% (पी <0.001).67 ए के पुनरावृत्ति अनुपात के साथ। झोंग एट अल द्वारा इसी तरह के अध्ययन की सूचना दी गई थी। 68 इसके अलावा, क्यूई ने पाया कि एचसीसी वाले 112 रोगियों में से 101 (90.81%), जिनमें प्रारंभिक चरण की बीमारी वाले लोग भी शामिल थे, सीटीसी के लिए सकारात्मक थे और यह कि बहुत छोटे एचसीसी नोड्यूल्स का पता 3 से 3 के बाद पाया गया। अनुवर्ती के 5 महीने। оу और р.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. झोउ एट अल ने पाया कि उन्नत एपकैम + सीटीसी और नियामक टी कोशिकाओं वाले रोगियों में एचसीसी पुनरावृत्ति का जोखिम कम सीटीसी वाले लोगों की तुलना में अधिक था, जिनकी पुनरावृत्ति दर 66.7% बनाम 10.3% ( पी <0.001) 67 थी।इसी तरह का एक अध्ययन झोंग एट अल द्वारा किया गया था।68. इसके अलावा, क्यूई ने पाया कि एचसीसी वाले 112 रोगियों (90.81%) में से 101, जिनमें प्रारंभिक बीमारी वाले लोग भी शामिल थे, में सीटीसी थे, और 3 से 5 महीनों के अनुवर्ती कार्रवाई के बाद बहुत छोटे एचसीसी नोड्यूल्स का पता चला था। झोउ सीटीसी एपीकैम + सीटीसी 和调节性टी एचसीसी 66.7% 和10.3% (पी <0.001)。 झोउ ctc epcam+ ctc t 3% ( पी <0.001)。。。。。。。。。。。。。。。 оу और р.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). झोउ एट अल।पाया गया कि उन्नत एपकैम + सीटीसी और नियामक टी कोशिकाओं वाले रोगियों में क्रमशः 66.7% और 10.3% की पुनरावृत्ति दर (पी <0.001) के साथ कम सीटीसी वाले रोगियों की तुलना में एचसीसी पुनरावृत्ति का अधिक जोखिम था।झोंग एट अल द्वारा इसी तरह के एक अध्ययन की सूचना दी गई थी।68 इसके अलावा, क्यूई ने पाया कि 112 एचसीसी रोगियों (90.81%) में से 101, जिनमें प्रारंभिक रोग के रोगी भी शामिल थे, के सीटीसी परिणाम सकारात्मक थे और 3 यात्राओं के बाद बहुत छोटे एचसीसी नोड्यूल पाए गए।5 महीने तक अवलोकन।उन्होंने क्रोनिक एचबीवी संक्रमण वाले 12 रोगियों में सीटीसी भी पाया और 2 सीटीसी पॉजिटिव रोगियों में 5 महीने के भीतर छोटे एचसीसी ट्यूमर पाए।69 इस प्रकार, सीटीसी का उपयोग एचसीसी, 70 की भविष्यवाणी करने के लिए किया जा सकता है, लेकिन उन्हें भविष्य कहनेवाला बायोमार्कर के रूप में अधिक नियमित रूप से उपयोग किया जा सकता है।
CfDNA की तरह, cfRNA को विभिन्न प्रणालियों के माध्यम से रक्तप्रवाह में छोड़ा जाता है।परिधीय रक्त में ये अणु मूल के कैंसरयुक्त ऊतक का प्रतिनिधित्व करते हैं।गैर-आक्रामक विधियों द्वारा पता लगाए गए मार्करों की तुलना में, cfRNAs अधिक गतिशील रूप से विनियमित, ऊतक-विशिष्ट और बाह्य वातावरण में प्रचुर मात्रा में होते हैं।कई अध्ययनों में HCC में 71 miRNAs (miRNAs) का महत्व और नैदानिक ​​​​मूल्य बताया गया है।miRNAs अंतर्जात गैर-कोडिंग आरएनए (एनसीआरएनए) हैं जो लक्ष्य दूत आरएनए (एमआरएनए) के अनुवाद को रोककर विभिन्न आणविक जैविक गतिविधियों को नियंत्रित करते हैं।miRNAs एक्सोसोम में एनकैप्सुलेटेड एपोप्टोटिक निकायों में स्थित हैं, लेकिन वे परिधीय रक्त में सीरम प्रोटीन और लिपिड को भी बांध सकते हैं और इसका उपयोग एचसीसी का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है।माइक्रोआरएनए यकृत पुनर्जनन, लिपिड चयापचय, एपोप्टोसिस, सूजन और एचसीसी के विकास में शामिल हैं।72 ऑन्कोजेनिक miRNAs जैसे miR-21, miR-155 और miR-221 HCC में अच्छी तरह से जाने जाते हैं।विशेष रूप से, miR-21 बाह्य मैट्रिक्स और फाइब्रोसिस में कोलेजन संश्लेषण में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है और हेमटोपोइएटिक स्टेम कोशिकाओं को सक्रिय करके हेपेटोकार्सिनोजेनेसिस को बढ़ावा देता है।HCC में 72,73 ट्यूमर सप्रेसर miRNAs में miRNA-122, miRNA-29, Let-7 परिवार और miRNA-15 परिवार शामिल हैं।Let-7 परिवार में कई ट्यूमर शमनकर्ता miRNAs होते हैं जो RAS परिवार को लक्षित करते हैं।miR-15 परिवार में miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 और miR-497 शामिल हैं, जिनमें कुछ mRNAs के लिए पूरक अनुक्रम हैं।इसके अलावा, लंबे गैर-कोडिंग आरएनए (एलएनसीआरएनए) और सर्कुलर आरएनए (सीआईआरएनए) भी एचसीसी की प्रारंभिक जांच के लिए महत्वपूर्ण हैं।lncRNAs ncRNAs के व्यापक वर्ग का प्रतिनिधित्व करते हैं, जिसमें mRNA जैसे ncRNAs शामिल हैं, और कई मानव रोगों के रोगजनन में शामिल हैं।LncRNAs लीवर माइक्रोएन्वायरमेंट और क्रोनिक लीवर रोग में एक नियामक भूमिका निभाते हैं।74 CircRNAs भी ncRNAs का एक वर्ग है जिसमें जीन अभिव्यक्ति के नियमन में कई कार्य होते हैं।हाल ही में, circRNAs को HCC के लिए नैदानिक ​​उपकरण के रूप में माना गया है।
परिसंचारी मुक्त आरएनए में उल्लेखनीय स्थिरता होती है, जिसमें तापमान, पीएच और आरएनएस का प्रतिरोध शामिल है, जो मानक आरएनए शुद्धिकरण विधियों का उपयोग करके परिधीय रक्त से एफएनआरएनए के अलगाव को कम थकाऊ बनाता है।सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली विधियों में एनजीएस, माइक्रोएरे और आरटी-क्यूपीसीआर शामिल हैं।एनजीएस पूरे जीनोम में माइक्रोआरएनए को मापने की अनुमति देता है।हालांकि, यह विधि महंगी है और विश्लेषण मानकीकृत नहीं है।इसके विपरीत, RT-qPCR सस्ता है, तेजी से न्यूक्लिक एसिड को बढ़ाता है, और उच्च संवेदनशीलता, उच्च सटीकता, व्यापक गतिशील रेंज और कम नमूनों की आवश्यकता जैसे कई फायदे प्रदान करता है।माइक्रोएरे एक अन्य विधि है जिसका उपयोग miRNA का पता लगाने के लिए किया जाता है जो पूरक डीएनए जांच के साथ लक्ष्य miRNAs के संवेदनशील और विशिष्ट संकरण पर आधारित है, 75 लेकिन माइक्रोएरे डेटा का विश्लेषण समय लेने वाला है।
परिसंचारी miR-122 और Let-7 को उच्च जोखिम वाले समूहों में प्रारंभिक चरण के एचसीसी के निदान में संभावित रूप से उपयोगी बताया गया है, एचबीवी से जुड़े प्रीमैलिग्नेंट नोड्यूल वाले रोगियों में मार्कर और प्रारंभिक चरण एचसीसी।76 कै एट अल।पाया गया कि Let-7 परिवार के सदस्य (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126, और miR-199a/b) को क्रोनिक होने का खतरा है। हेपेटाइटिस के रोगियों में एच.सी.सी.लेट -7 परिवार क्रोनिक हेपेटाइटिस सी से जुड़े उच्च जोखिम वाले समूहों में एचसीसी के विकास की भविष्यवाणी करने के लिए एक प्रभावी सरोगेट बायोमार्कर के रूप में काम कर सकता है। 77 एमआईआर-122 में लीवर सिरोसिस के रोगियों में एचसीसी का जल्दी पता लगाने में उच्च नैदानिक ​​​​सटीकता है।78 सीरम परिसंचारी एमआईआर-107 का मूल्यांकन एचसीसी, 79 के शुरुआती चरणों में भी किया गया है और उच्च जोखिम वाली आबादी में अच्छी क्षमता दिखाई है।झोउ एट अल ने बताया कि miRNAs (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a और miR-801) का एक पैनल एचसीसी को क्रोनिक हेपेटाइटिस बी (सीएचबी) और सिरोसिस से अलग कर सकता है। संवेदनशीलता क्रमशः 79.1% और 75% और विशिष्टता 76.4% और 91.1% थी।80 HBV-संबंधित HCC में, हमने पाया कि बिना HCC (संवेदनशीलता 79.1%, विशिष्टता 76.5%) के पुराने HBV रोगियों की तुलना में miR150 का स्तर काफी कम हो गया था।-224 को स्वस्थ नियंत्रणों की तुलना में एचसीसी में ऊंचा किया गया था, और उपसमूह विश्लेषणों ने एचबीवी से जुड़े एचसीसी वाले रोगियों में उच्च स्तर दिखाया।हेपेटाइटिस बी से जुड़े सिरोसिस और एचसीसी रोगियों ने एक सीआरएनए क्लासिफायर की पहचान की जिसमें सात अलग-अलग व्यक्त सीआरएनए होते हैं जो विभिन्न नियंत्रणों में एचसीसी का पता लगा सकते हैं;एएफपी स्वयंसेवकों की तुलना में प्रारंभिक जांच में एयूसी रेंज बेहतर है।उन्होंने पाया कि चार miRNAs (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p, और miR-365a-3p) HCC वाले रोगियों को HCC के बिना रोगियों से अलग कर सकते हैं।पांच ओवरएक्सप्रेसिंग miRNAs (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p, और miR-148a-3p) को विशेष रूप से HCC, सिरोसिस और CHB बायोमार्कर में संभावित HBV संक्रमण माना जाता है। miR-34a-5p लीवर सिरोसिस के लिए बायोमार्कर हो सकता है, 85 और उच्च जोखिम वाली आबादी में एचसीसी की शुरुआती जांच के लिए संभावित बायोमार्कर हो सकता है।HCC में सबसे अधिक अध्ययन किया गया lncRNA लीवर कैंसर (HULC) में अत्यधिक सक्रिय है।अन्य अध्ययनों से पता चला है कि एचसीसी रोगियों में परिसंचारी एचयूएलसी का उपयोग नैदानिक ​​मार्कर के रूप में किया जा सकता है क्योंकि स्वस्थ व्यक्तियों की तुलना में एचसीसी रोगियों में यह lncRNA अत्यधिक अपग्रेड होता है।71,86 अन्य lnRNAs में, LINC00152 को इसकी उच्च AUC, संवेदनशीलता और विशिष्टता के कारण सबसे अच्छा नैदानिक ​​lncRNA माना जाता है।86 एक अध्ययन में, LINC00152 की परिधीय रक्त अभिव्यक्ति धीरे-धीरे सामान्य स्वस्थ नियंत्रण से सीएचबी और सिरोसिस के रोगियों तक बढ़ गई, और अंत में एचसीसी में उच्चतम थी।HCC के रोगियों के प्लाज्मा में circSMARCA5 की अभिव्यक्ति के अध्ययन ने HCC में हेपेटाइटिस से लेकर सिरोसिस और पूर्व कैंसर के घावों तक की अभिव्यक्ति में प्रगतिशील गिरावट दिखाई है।87 आरओसी वक्रों के विश्लेषण ने एचसीसी वाले लोगों से हेपेटाइटिस या यकृत सिरोसिस वाले रोगियों में अंतर करने में इन सर्केना की क्षमता की पुष्टि की, विशेष रूप से 200 एनजी / एमएल से नीचे एएफपी स्तर वाले।इसके अलावा, झू ने एचबीवी से जुड़े एचसीसी रोगियों के प्लाज्मा नमूनों में 13,617 चक्रीय आरएनए का विश्लेषण किया और पुष्टि की कि एचसीसी और एचबीवी से जुड़े सिरोसिस में 6 चक्रीय आरएनए अलग-अलग व्यक्त किए गए थे, यह सुझाव देते हुए कि सीआरएनए फायदेमंद हो सकते हैं।उच्च जोखिम वाले समूहों जैसे कि जिगर की बीमारी, स्केलेरोसिस रोगियों से जुड़े लोगों की शीघ्र जांच के लिए मार्कर।88
एक्सोसोम झिल्ली पुटिका होते हैं जिनका व्यास 40-160 एनएम होता है;कई इंट्रासेल्युलर पुटिका कोशिका झिल्ली के साथ फ्यूज हो जाती हैं और बाह्य मैट्रिक्स में छोड़ी जाती हैं।उनमें लिपिड, प्रोटीन, आरएनए और डीएनए सहित कई सक्रिय घटक होते हैं, और एचसीसी और गैर-एचसीसी कोशिकाओं दोनों के बीच संचार में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।89,90 एक्सोसोम हेपेटोसाइट फाइब्रोब्लास्ट और स्टेलेट कोशिकाओं, प्रतिरक्षा कोशिकाओं, सामान्य हेपेटोसाइट्स और एचसीसी कोशिकाओं को सक्रिय करके एचसीसी की प्रगति को नियंत्रित करते हैं।91 ट्यूमर माइक्रोएन्वायरमेंट में, ट्यूमर कोशिकाएं बड़ी संख्या में एक्सोसोम उत्पन्न करती हैं जिन्हें कैंसर कोशिकाओं से अपरिपक्व कोशिकाओं तक ले जाया जाता है, जो बदले में ऑन्कोजेनेसिस, गिरावट और सेलुलर सिग्नलिंग में शामिल होते हैं।92 अध्ययनों से पता चला है कि एक्सोसोम पैथोलॉजिकल प्रक्रियाओं के दौरान ऑन्कोजीन को सामान्य कोशिकाओं में स्थानांतरित कर सकते हैं, जो ट्यूमर के आक्रमण और मेटास्टेसिस के तंत्र में से एक हो सकता है।93 कैंसर की प्रगति में एक्सोसोम की भूमिका गतिशील और कैंसर के प्रकार के लिए विशिष्ट हो सकती है, 89 प्राप्तकर्ता कोशिकाओं में कई लक्ष्य जीनों को विनियमित करने के लिए आसन्न या दूर की कोशिकाओं द्वारा एक्सोसोम को आंतरिक किया जा सकता है जो अंतरकोशिकीय संचार आयनों और सेलुलर माइक्रोएन्वायरमेंट इंटरैक्शन में शामिल हो सकते हैं, वे कर सकते हैं मध्यस्थता सेलुलर सिग्नलिंग और चयापचय।94 एक्सोसोम कार्गो अणुओं के लक्षण और गतिशील परिवर्तन सीधे माता-पिता के ट्यूमर कोशिकाओं की विशेषताओं और गतिशील परिवर्तनों को दर्शाते हैं, 95 जो कैंसर के निदान और निदान में एक्सोसोम के उपयोग के साथ-साथ एंटीकैंसर थेरेपी के लिए व्यक्तिगत प्रतिक्रिया की भविष्यवाणी के लिए भी आधार है। ..96
एक्सोसोम को अलग करने और उनका विश्लेषण करने के लिए पारंपरिक प्रयोगशाला विधियां जटिल, बहु-चरण और समय लेने वाली हैं, जिनमें अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन, निस्पंदन, आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी, इम्यूनोफिनिटी शुद्धि, पश्चिमी सोख्ता, एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा), पीसीआर और प्रवाह विश्लेषण शामिल हैं।सूक्ष्म/नैनो प्रौद्योगिकी का उपयोग करते हुए लघुकृत प्रणालियों और लैब-ऑन-ए-चिप प्लेटफार्मों को एक्सोसोम के स्वस्थानी अलगाव में तेज, सुविधाजनक के लिए व्यापक रूप से विकसित किया जा रहा है।नैनोपार्टिकल ट्रैकिंग विश्लेषण (एनटीए) एक्सोसोम के आकार और एकाग्रता को चिह्नित करने के लिए व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि है, जिसमें चुंबकीय नैनोकणों और पॉलीहाइड्रोक्सीकैनोएट्स जैसे तरीके शामिल हैं।माइक्रोफ्लुइडिक और इलेक्ट्रोकेमिकल तरीके भी उच्च पैदावार में एक्सोसोम का तेजी से पता लगा सकते हैं।
एचसीसी के निदान के लिए एक्सोसोमल प्रोटीन महत्वपूर्ण मार्कर हैं।Arbelaiz अध्ययन में, 98 RasGAP SH3 बाइंडिंग प्रोटीन (G3BP) और पॉलीमेरिक इम्युनोग्लोबुलिन रिसेप्टर (PIGR) का स्तर HCC-व्युत्पन्न एक्सोसोम में काफी ऊंचा हो गया था, और दो प्रोटीनों की संयुक्त संयुक्त प्रभावकारिता AFP से बेहतर थी।आयरन अधिभार एचसीसी के विकास में योगदान देने वाला एक महत्वपूर्ण कारक है।त्सेंग ने बताया कि एचसीसी के प्रतिरोध में हेक्सिडिन महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकता है।एचसीसी रोगियों के सीरा से प्राप्त 99 एक्सोसोम में उनके स्वस्थ समकक्षों की तुलना में हेक्सिडिन एमआरएनए वेरिएंट की काफी अधिक प्रतिलिपि संख्या थी, यह सुझाव देते हुए कि हेक्सिडिन एचसीसी के लिए एक उपन्यास नैदानिक ​​​​बायोमार्कर हो सकता है।100 एचसीसी द्वारा उत्पादित एक्सोसोम में 14-3-3ζ प्रोटीन टी सेल सक्रियण, प्रसार और भेदभाव को कम कर सकता है और टी सेल परिवर्तन को नियामक टी कोशिकाओं में प्रेरित कर सकता है, जिसके परिणामस्वरूप टी सेल की कमी हो सकती है।101 यह प्रतिरक्षा निगरानी से ट्यूमर की चोरी की जांच करने वाले कई अध्ययनों द्वारा समर्थित है, 102 जो एचसीसी ट्यूमरजेनिसिस में योगदान कर सकता है।
प्लाज्मा या सीरम में ईसीआरएनए की उपस्थिति के अलावा, आरएनए-समृद्ध एक्सोसोम का उपयोग प्रारंभिक ट्यूमर स्क्रीनिंग में गैर-इनवेसिव रीयल-टाइम स्टेजिंग के लिए और ट्यूमर के विकास और थेरेपी की प्रतिक्रिया निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है।एचसीसी समूह में रक्त सीरम में एक्सोसोमल miRNA-21 का स्तर सीएचबी समूह की तुलना में 2.21 गुना अधिक था, और एचसीसी समूह में यह स्वस्थ आबादी की तुलना में 5.57 गुना अधिक था।वांग अध्ययन में, एक्सोसोम ने 0.83 (95% सीआई 0.74–0.93) और 0.94 (95% सीआई 0.88–1.00) के एयूसी मूल्यों वाले सिरोसिस रोगियों की तुलना में एचसीसी में काफी वृद्धि की।104 प्राप्त आंकड़ों ने ऑन्कोजेनेसिस और एचसीसी प्रगति के नियमन में विशिष्ट एक्सोसोमल कार्गो अणुओं की भागीदारी को स्पष्ट किया।miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 और miR-26a की 105 सीरम अभिव्यक्ति सुसंगत है।और मेटास्टेसिस, और miR21 का स्तर स्वस्थ नियंत्रण की तुलना में HCC रोगियों में और CHB रोगियों में भी बहुत अधिक था। HCC में 102 LncRNA का संभावित नैदानिक ​​​​मूल्य था।अध्ययनों से पता चला है कि एचसीसी रोगियों के सीरा से प्राप्त एक्सोसोम में LINC00161, LINC000635, और lncRNA के उच्च स्तर होते हैं, जो HCC के बिना रोगियों की तुलना में विकास कारक-β को बदलकर सक्रिय होते हैं, और ये lncRNAs दृढ़ता से TNM चरण और ट्यूमर की मात्रा से जुड़े होते हैं।110 कोनिग्लियारो एट अल।CD90+ एक्सोसोम में lncRNAH19 के उच्च स्तर को व्यक्त करने के लिए पाया गया, जिसने संवहनी एंडोथेलियल ग्रोथ फैक्टर (VEGF) रिलीज और VEGF-R1 रिसेप्टर उत्पादन में काफी वृद्धि की, जिससे एंजियोजेनेसिस को उत्तेजित किया गया।93 CircRNAs एक अन्य प्रकार के एक्सोसोमल ncRNAs हैं - प्रजातियों में निचले लेकिन स्थिर स्तरों पर व्यक्त किए जाते हैं, circRNAs सेल प्रकार, ऊतक प्रकार, विकासात्मक चरण और नियामक गतिविधि के लिए विशिष्टता भी दिखाते हैं।111 सर्केना प्रारंभिक और न्यूनतम आक्रमणकारी कैंसर के लिए नैदानिक ​​बायोमार्कर हैं।112 हाल के नैदानिक ​​परीक्षणों से पता चला है कि एचसीसी की भविष्यवाणी करने में व्यक्तिगत miRNAs की विशिष्टता आदर्श नहीं है।इसलिए, कई assays (जैसे, एएफपी के साथ संयोजन में miR-122 और miR-48a) का उपयोग करके जटिल पता लगाने से प्रारंभिक एचसीसी की पहचान और सिरोसिस से एचसीसी के भेदभाव में सुधार हो सकता है।100
एचसीसी विकसित करने के लिए सीएचबी और लीवर सिरोसिस वाले मरीज सबसे आम उच्च जोखिम वाले समूह हैं।उच्च जोखिम वाले समूहों के लिए, एक बार एक निरंतर वायरोलॉजिकल प्रतिक्रिया प्राप्त हो जाने के बाद, एचसीसी जोखिम पर आधारित एक लागत प्रभावी निगरानी रणनीति विकसित की जानी चाहिए, और उच्च लागत-प्रभावशीलता अनुपात के साथ एचसीसी के निदान और उपचार में सुधार के लिए प्रारंभिक जांच महत्वपूर्ण है। ..कैंसर के लिए प्रारंभिक जांच के तरीकों की कई सीमाएं हैं: अधिकांश प्रकार के कैंसर के लिए प्रभावी प्रारंभिक जांच विधियां विकसित नहीं की गई हैं, और पालन आमतौर पर कम होता है।पारंपरिक प्रारंभिक स्क्रीनिंग विधियों की तुलना में, तरल बायोप्सी तकनीक के स्पष्ट फायदे हैं: नमूने में आसानी, पैनराक का पता लगाना, अच्छा नमूना प्रजनन क्षमता और ट्यूमर की विषमता के लिए प्रभावी प्रतिक्रिया।तरल बायोप्सी से जुड़े तरीकों की लागत-प्रभावशीलता को देखते हुए, एचसीसी स्क्रीनिंग में उनके उपयोग का नियमित परीक्षण नहीं किया गया है।आणविक स्तर पर सटीक पता लगाने में प्रगति के बावजूद, तरल बायोप्सी लक्षित रोगियों में एचसीसी का पता लगाने के लिए महंगा है, अल्ट्रासाउंड और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग जैसी विशिष्ट इमेजिंग प्रक्रियाओं की तुलना में इसके व्यापक उपयोग को सीमित करता है।113,114 हालांकि, पिछले अध्ययन से पता चला है कि तरल बायोप्सी ने गुणवत्ता-समायोजित जीवन वर्ष (QALYs) के संदर्भ में एक महत्वपूर्ण लाभ दिखाया।115 पेट और नासोफरीनक्स के प्रारंभिक कार्सिनोमा में तरल बायोप्सी के लाभ भी दिखाए गए हैं।116,117 वर्तमान दृष्टिकोण यह है कि तरल बायोप्सी ट्यूमर का पता लगाने और निदान में सीरम बायोमार्कर और रेडियोलॉजिकल स्क्रीनिंग को पूरक कर सकती है।117 118
वर्तमान साहित्य के अनुसार, लिवर कैंसर के लिए उच्च जोखिम वाले समूहों की प्रारंभिक जांच में द्रव बायोप्सी तकनीक ने काफी उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता दिखाई है।द्रव बायोप्सी के प्रकार के बावजूद, यह एचसीसी को एचसीसी के बिना उच्च जोखिम वाले व्यक्तियों से अलग कर सकता है, प्रारंभिक जांच के महत्व का सुझाव देता है क्योंकि उच्च जोखिम और स्वस्थ व्यक्तियों के बीच अंतर स्पष्ट हैं।ctDNA का आधा जीवन छोटा होता है और इसका उपयोग HCC का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, इसलिए ट्यूमर-व्युत्पन्न cDNA में कोई भी परिवर्तन ट्यूमर की प्रगति के वास्तविक समय के ठोस सबूत प्रदान कर सकता है, विशेष रूप से छोटे ट्यूमर के लिए।सीटीडीएनए का एक उच्च स्तर कैंसर के विकास और प्रसार को इंगित करता है और प्रगति और पुनरावृत्ति का प्रारंभिक संकेतक है।इसके अलावा, सीटीडीएनए के परिणामों के आधार पर, रोगी व्यक्तिगत उपचार और अनुवर्ती कार्रवाई प्राप्त कर सकते हैं।119 विशिष्ट मिथाइलेशन साइट एचसीसी और सिरोथिक नोड्यूल की प्रारंभिक पहचान के लिए एएफपी से बेहतर मार्कर हो सकते हैं।एचसीसी के संक्रमणीय मामलों में, सीडीएनए का उच्च स्तर माइक्रोवैस्कुलर आक्रमण और पोस्टऑपरेटिव पुनरावृत्ति और मेटास्टेसिस का संकेत है।प्रतिलिपि संख्या में परिवर्तन एचसीसी वाले रोगियों के जीवित रहने से जुड़े हैं।यह माना जा सकता है कि सीडीएनए मूल्यांकन एचसीसी के समग्र उपचार में शामिल हो सकता है, और सीडीएनए चिकित्सीय मॉडुलन के एक प्रभावी संकेतक के रूप में काम कर सकता है।नैदानिक ​​​​दिशानिर्देशों द्वारा ctDNA में विशिष्ट आनुवंशिक उत्परिवर्तन के आधार पर मार्करों को प्रभावकारिता की भविष्यवाणी करने और दवा प्रतिरोध की निगरानी के लिए अपनाया गया है।प्रारंभिक जांच के लिए सीटीडीएनए परीक्षण सबसे उपयोगी तरल बायोप्सी उपकरण हो सकता है।सीटीसी उच्च जोखिम वाले एचसीसी समूहों की प्रारंभिक जांच में भी महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।एचसीसी से जुड़े सीटीसी के विभिन्न मार्कर एचसीसी की शुरुआत, विकास और पुनरावृत्ति में विशेष महत्व रखते हैं।झिल्ली पुटिकाओं के रूप में, एक्सोसोम अंतरकोशिकीय संचार में शामिल होते हैं, विशेष रूप से एचसीसी कोशिकाओं में।परिसंचारी माइक्रोआरएनए रक्त में स्थिर होते हैं और इस प्रकार एचसीसी की शीघ्र जांच के लिए अधिक उपयोगी हो सकते हैं।धीरे-धीरे, एक्सोसोमल प्रोटीन और आरएनए-समृद्ध एक्सोसोम की खोज की गई, और एचसीसी के लिए उनकी भविष्य कहनेवाला प्रभावकारिता की पुष्टि की गई।दिलचस्प बात यह है कि एचसीसी के अलग-अलग एटियलजि भी अलग-अलग म्यूटेशन से जुड़े हो सकते हैं, इसलिए हम एचसीसी के विभिन्न एटियलजि के आधार पर शुरुआती जांच के लिए अलग-अलग बायोमार्कर का चयन कर सकते हैं।120
हालांकि, वर्तमान द्रव बायोप्सी तकनीक स्थिरता के मामले में संदिग्ध हैं और स्वतंत्र रूप से एचसीसी की प्रारंभिक जांच या निगरानी नहीं कर सकती हैं, लेकिन फिर भी व्यक्तिगत जांच और निदान को पूरक कर सकती हैं।121 तरल बायोप्सी के रूप में, सीटीडीएनए, सीटीसी, सीएफआरएनए और एक्सोसोम से जुड़े एएफपी या पीआईवीकेए-द्वितीय का पता लगाने और इमेजिंग में एचसीसी के शुरुआती निदान और पूर्वानुमान में आशाजनक अनुप्रयोग हैं।हालांकि, रक्त में ctDNA रिलीज की सटीक व्यवस्था को स्पष्ट किया जाना बाकी है।सीटीडीएनए के मूल जैविक गुणों को प्रकट करने से मार्कर के रूप में इसके उपयोग में आसानी हो सकती है।संचलन में ctDNA की छोटी मात्रा और सख्त नमूना हैंडलिंग आवश्यकताएं HCC में cDNA का पता लगाने के नैदानिक ​​​​कार्यान्वयन के लिए चुनौतियां हैं।इसके अलावा, आनुवंशिक उत्परिवर्तन में विशिष्ट विशेषताएं नहीं होती हैं जो कार्सिनोजेन्स की सटीक पहचान की अनुमति देती हैं।चूंकि सामान्य ऊतकों में कई आनुवंशिक और दैहिक रूप भी मौजूद होते हैं, द्रव बायोप्सी द्वारा पहचाने गए आनुवंशिक उत्परिवर्तन एचसीसी के लिए प्रारंभिक जांच में सीमित उपयोगिता के हो सकते हैं।122 अच्छी तरह से परिभाषित उपयोगी जीन लक्ष्य और बायोमार्कर की सीमाएं जो गैर-ट्यूमर डीएनए से सीडीएनए को अलग करने में मदद करती हैं, सीडीएनए के उपयोग में सबसे महत्वपूर्ण मुद्दे हैं।सीटीसी का पता लगाने के लिए संवेदनशील और विशिष्ट मार्करों की उपयोगिता की कमी।केवल मेटास्टेटिक क्षमता वाली व्यवहार्य कोशिकाएं पाई गईं, और सीएससी समृद्ध मार्करों का इष्टतम संयोजन अस्पष्ट था।संस्कृति के लिए सीटीसी का अलगाव और उनके पारस्परिक प्रोफाइल का मूल्यांकन भी एक चुनौतीपूर्ण कार्य है।एक्सोसोम की पहचान, अलगाव और शुद्धिकरण के साथ समस्याओं के कारण, विशिष्ट आणविक तंत्र अभी भी स्पष्ट नहीं है, और एक्सोसोम और एचसीसी के तंत्र पर पिछले अध्ययन गहराई में नहीं हैं, और जिस तरह से miRNAs, lncRNAs और प्रोटीन को एक्सोसोम में सॉर्ट किया जाता है। , और यह स्पष्ट नहीं है कि एक्सोसोम अपटेक एक विशिष्ट प्रकार की प्रक्रिया है या नहीं।एचसीसी के निदान और उपचार के लिए एक्सोसोम का उपयोग अभी भी प्रीक्लिनिकल चरण में है।तरल बायोप्सी प्रक्रियाओं के मानकीकरण की कमी, जैसे रक्त, रक्त की मात्रा, नमूना भंडारण और पता लगाने, अलगाव और संवर्धन के लिए उपयोग की जाने वाली ट्यूबों के प्रकार, चिकित्सा केंद्रों में प्रथाओं में अंतर के कारण नियमित नैदानिक ​​​​अभ्यास में उनके उपयोग को रोक सकते हैं।प्रारंभिक जांच, निदान, प्रभावकारिता मूल्यांकन और एचसीसी की भविष्यवाणी में तरल बायोप्सी की प्रभावकारिता का पता लगाया जाना बाकी है, खासकर उच्च जोखिम वाले समूहों के लिए।तरल बायोप्सी तकनीक में काफी संभावनाएं हैं और निकट भविष्य में यकृत कैंसर के नैदानिक ​​अभ्यास में व्यापक रूप से उपयोग किए जाने की उम्मीद है।
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